L-Tyrosiini pulber CAS 60-18-4

Kariloomade ja kodulindude tootmise parandamine
0,2% L-türosiini lisamine põrsade dieedile võib suurendada igapäevase kehakaalu tõusu 8% ja sööda muundamise määra 6%. Selle mehhanism on seotud kasvuhormooni sekretsiooni ja soolestiku arengu edendamisega.
Veeloomade tugevdatud stressiresistentsus
Lõuna-Ameerika valgete krevettide söödale 0,1% L-türosiini lisamine võib märkimisväärselt parandada selle madalat hapniku tolerantsi ja suurendada vesiviljeluse ellujäämist 12%.
Lemmikloomatoidu funktsionaliseerimine
Kasside olulise aminohappena võib see ära hoida puuduse põhjustatud nahakahjustusi. L-türosiini lisamine eakatele koertele võib parandada kognitiivset kahjustust ja parandada ruumilist mäluvõimet.

Uurimisvaldkond: rakukultuuri ja biokeemiliste uuringute põhireaktiivid

Seerumivaba söötme areng
L-türosiin on seerumivabad söötmed, näiteks CHO rakud ja HEK293 rakud, oluline komponent. Monoklonaalsete antikehade tootmisel võib L-türosiini täiendamine suurendada antikehade tootmist 15%, vähendades samal ajal rakkude apoptoosi kiirust.
Valkude struktuuri ja funktsiooni uurimine
Peptiidi lämmastikusisalduse määramise standardina kasutatakse seda kolorimeetriliseks kvantitatiivseks analüüsiks Milon reaktsioonis. Selle derivaati fluorestsentselt märgistatud türosiini (FITC TYR) on laialdaselt kasutatud valkude interaktsiooni uurimisel.

Haiguse mudeli ehitamine
Parkinsoni tõve rakumudelites pakuvad metaboolsete kõrvalekallete uuringud olulisi vihjeid neurodegeneratiivsete haiguste mehhanismidele.

1. ensümaatiline meetod:

Ensümaatiline meetod, mida tuntakse ka kui mikroobide muundamise meetodit, kasutab mikroobirakkudes peamiselt türosiinfenoollüaasi (TPL, EC 4.1.99,2) fenooli, püruviinhappe ja ammoniaagi või fenooli muutmiseks L-seriini L-türosiiniks. Suurema ensüümi aktiivsusega TPL ja rohkem uurimistulemusi pärinevad peamiselt mikroorganismi Erwinia Herbicola, Citrobacter Inliktius, Citrobacter Freundii ja termofiilsete bakterite põhjal. Genex Company Lee ja Hsiao kasutasid esimesena Klebsiella aerogenes seriin hüdroksümetüültransferaasi ja Erwinia herbicola ATCC 21434 türosiinfenoollüaasi, et ühendada sünteesimise L-seriini reaktsiooni glütsiiniga 1986-ga. fenool, 0,25 m glütsiin, 0,5 mM 5 -püridoksaalfosfaat, 0,056 m 500 ml reaktsioonisüsteemis - merkaptoetanool, 1,7 mM tetrahüdrofolaadi. PH 7,0 ja 37 kraadi alusel alustati reaktsiooni 37% formaldehüüdiga. Pärast 16 tundi toodeti 26,3 g/l l-tyrosiini ja glütsiini muundamise määr ulatus 61,4%-ni. Selle protsessi stabiilsus on siiski halb ja glütsiinil on TPL -i aktiivsusele tugev pärssiv mõju. Arvestades halva ensüümi aktiivsust ja stabiilsust reaktsiooniprotsessis, on DNA segamise tehnoloogia kasutamine TPL stabiilsuse parandamiseks ka viimastel aastatel tähelepanu pälvinud. Eugene jt. Kribb Lõuna -Koreas saadud AS6 mutantse katalüütilise aktiivsusega suurenes kolm korda ja poole inaktiveerimise temperatuur kasvas TPL juhusliku mutatsiooni sõelumise kaudu 11,2 kraadi võrra Symbiobacterium TOEBII ja astmelise DNA segamise ajal. Sekveneerimise tulemused näitasid, et katalüütilises aktiivses piirkonnas olid T129I või T451A mutatsioonid ning kolm mutatsiooni, sealhulgas A13V, E83K ja T407A, olid termilise stabiilsuse parandamiseks suureks abiks. Ja Kim jt. Sellest E coli BL21 (DE3) uurimisrühmast väljendas TPL -i parema katalüütilise aktiivsuse ja termilise stabiilsusega ning valmistas toorkatalüütilise ekstrakti ette. 2,5L voolu lisamise reaktorisüsteemis lisati partiidesse 2,2 m fenool, 2,4 m naatriumpüruvaat, 0,4 mM 5-püridoksaalfosfaat ja 4 M ammooniumkloriid 4 M ammooniumkloriid ning reaktsioonipaagi ületamisel täideti nitrogeen, et vähendada substraadi oksüdeerumist ja 30 tundi. Fenool võib ulatuda 94%-ni.

2. mikroobne kääritamine:

Mikroobne kääritamine võtab toorainena tavaliselt glütserooli, glükoosi ja muid biomassi süsinikuallikaid ning akumuleerub L-türosiini suurepäraste mikroobsete tüvede kääritamise kaudu sobivates tingimustes. Varased uuringud kasutasid valimiseks sageli kunstlikku mutageneesiL-türosiinpulberKõrge saagikusega tüved, näiteks l-fenüülalaniini või l-tryptofaani defektsed või tagasisidevastased inhibeerimistüved. Enamiku mikroorganismide võime akumuleeruda on siiski väga madal ja nende metaboolsete radade regulatiivne mehhanism on väga keeruline. Traditsioonilised mutatsioonide aretusmeetodid võivad toimida ainult kohalikel metaboolsetel radadel või võtmeensüümidel ning on keeruline mõjutada suurt mõju üldisele L-Tyrosiini metaboolsele voolule. Viimastel aastatel on metaboolse tehnika kiire arengu ja mitmesuguste kaugelearenenud biotehnoloogia arenguga muutunud uurimistöö leviala, et ümber kujundada mikroorganismide metaboolne rada, et paremini mõista L-türosiini kääritamist. L-türosiini metaboolsete inseneribakterite hulka kuuluvad peamiselt Escherichia coli, Corynebacterium glutamicum, Brevibacterium flavum ja Bacillus subtilis. Nende hulgas on L-türosiini sünteesi rada ja regulatsiooni mehhanismi Escherichia coli ja Bacillus glutamicumis kõige rohkem uuritud ja kõige selgemalt selgitatud.

L-türosiini biosünteesi rada kuulub aromaatsete aminohapete biosünteesi rada. Selle sünteesi, erütroosi-4-fosfaadi (E4P) ja fosfoenolpüruvaadi (PEP) eelkäija on kondenseerunud DAHP sünteetaasi (DS) katalüüsi all, et saada 3-deoksü-D-D-Arabinoptanosüül-7-fosfaat (DAHP), mis on L-Toot, mis on ka L-Path of Liening of Lising. Escherichia colis sisaldab DAHP süntetaas kolme isoensüümi: AROG, AROF ja AROH. Selle ekspressiooni ja aktiivsust pärssib ja surub pärssis vastavalt produktide L-fenüülalaniini, L-türosiini ja L-Tryptofaani tagasiside. 7-astmeline reaktsioon DAHP-st hargnenud hapeteni on tavaline viis kõigi aromaatsete aminohapete jaoks. Hargnenud hape on aromaatse aminohapete sünteesi raja haru punkt. L-Tryptophani sünteesimiseks kasutatakse ühte haruteed ja teine ​​osa genereerib 4-hüdroksüfenüülpüruvaadi (4HPP) hargnenud happe mutaasi (CM) ja preten-dehüdraadi (PD) bifunktsionaalse ensüümi Tyra toimel. Viimane genereerib L-türosiini L-glutamaadiga transAminatsiooni kaudu, Tyra ekspressiooni ja aktiivsust pärsib ka L-türosiini tagasiside.

3. Ekstraheerimismeetod:

Ekstraheerimismeetodi leiutas Bracannot esmakordselt 1820. aastal. Ta ekstraheeris glütsiini ja leutsiini želatiini lambanahast ja lihashüdrolüsaadist. Pärast seda on Bopp jt. Järk -järgult hüdrolüüsiti türosiini ja seriini valgust. Vanim aminohapete tootmise protsess, nimelt valgeaine hüdrolüüsi ekstraheerimine. Valku saab hüdrolüüda ensüümi, happe või leidlikkuse abil ning lõppprodukt on aminohape . 6 m vesinikkloriidhapet kasutatakse tavaliselt 110 kraadi hüdrolüüsimiseks 12-24 tundi. Pärast liigse happe eemaldamist ekstraheeritakse erinevate aminohapete segu. Lõpuks saadi aminohapete suhteline puhtus lahustuvuse erinevuse või ioonvahetuse vaigu meetodil.

1930. ja 1940. aastateks võis ekstraheerimismeetodi abil saada rohkem kui 20 aminohapet. Kõige kuulsam aminohapete tööstus on monosatriumglutamaat. Tänapäeval, kuigi enamikku aminohappeid saab erinevatest ressurssidest eraldada, ei ole see ressursside kõrge maksumuse, madala saagikuse, keskkonnareostuse ja muude põhjuste tõttu sobiv suuremahulise tootmise jätkamiseks. Südame türosiini tootmiseks mõeldud ekstraheerimismeetod kasutab üldiselt looduslikke valguressursse toorainena, hüdrolüüsi, kontsentratsiooni, kristallimise, dekoloorimise ja muude etappidena südame türosiini eraldamiseks ja ekstraheerimiseks. Kuna L-tümiini sisaldus ekstraheeritud produktis on madal, on ekstraheerimismeetodi saagis tegelikult madal, nii et see ei sobi suuremahuliseks tootmiseks.

4. keemilise sünteesi meetodL-türosiinpulber:

Ehkki aminohapete sünteesimiseks on kasutatud keemilist sünteesi alates 19. sajandist, kasutati keemilist sünteesi alles 1950ndatel aminohapete sünteesimiseks. See meetod kasutab aminohapete tootmiseks orgaanilise sünteesi ja keemiatehnika tehnoloogiat. Selle suurim eelis on see, et seda ei piira aminohapete mitmekesisus. Lisaks looduslike aminohapete valmistamisele võib see toota ka mitte looduslikke aminohappeid, sealhulgas mõnda väga spetsiaalse struktuuriga aminohappeid, ja seda saab toota suures mahus. Kuid keemilistel meetoditel on ka puudused. Peamine probleem on see, et protsess on suhteliselt keeruline. Sünteesida saab ainult aminohapete D- ja L-tüüpi ratseaate. Ainult pärast optilise eraldusvõime saamist saab aktiivseid aktiivseid aminohappeid. Siiani toodetakse endiselt palju aminohappeid keemilise sünteesi, eriti D ja L-metioniini abil, mida kasutatakse laialdaselt söödas. Tootmismeetod on ainult keemiline süntees ja väljund on umbes mitusada tuhat tonni aastas. Lisaks on farmatseutilise ja söödava glütsiini suuremahuline tootmismeetod ka keemiline süntees L-türosiin.