Tetrametüülbensidiin CAS 54827-17-7

Kliinilise in vitro diagnostika valdkonnas on TMB ensüümi{0}}immunosorbentanalüüsi (ELISA) põhiline kromogeenne substraat ja enamiku immuunanalüüsi komplektide põhiline funktsionaalne komponent. Nakkushaiguste seroloogilise tuvastamise valdkonnas on ELISA komplektid nakkushaiguste, nagu BB-hepatiidi, C-hepatiidi antikehade ja AIDS-i antikehade sõeluuringuks, mis põhinevad TMB kromogeensel süsteemil ja millel on äärmiselt madal taustavärv ja kõrge tuvastamistundlikkus, muutunud kodumaiste verejaamade ulatuslikuks{2}}vere sõeluuringuks.

Kodumaiste verejaamade rakendusandmed näitavad, et BB-hepatiidi pinnaantigeeni minimaalne avastamispiir võib ulatuda 0,1 IU/mL-ni, kui vereanalüüsi komplekt kasutab kromogeense substraadina TMB-d.

Võrreldes traditsioonilise OPD kromogeense süsteemiga väheneb vale-negatiivse diagnoosimise määr 90% võrra, blokeerides täielikult vereülekandega seotud nakkushaiguste leviku allikast. Rutiinsel ambulatoorsel nakkushaiguste sõeluuringul kolmanda taseme haiglates kontrollib TMB kolorimeetrilise süsteemi ELISA komplekt tuvastamistulemuste partiidevahelist erinevust 5% piires, kahekordistab tuvastamiskiirust võrreldes traditsiooniliste meetoditega ja suudab päevas läbi viia tuhandete proovide suure läbilaskevõimega testimise.

Vastab suurepäraselt nakkushaiguste varase sõeluuringu vajadustele suurtes{0}}populatsioonides. Hormoonide ja kasvajamarkerite kliinilises tuvastamises tõstetakse veelgi esile TMB kolorimeetrilise süsteemi kõrge tundlikkuse eelis. Kilpnäärme funktsiooni hormoonindikaatorite (nt TSH, T3, T4 jne) tuvastamisel on TMB värvide arendamise dünaamiline lineaarne vahemik kolm korda laiem kui traditsiooniliste värvide arendusreaktiivide puhul, mis suudab täpselt katta kogu kontsentratsioonivahemiku tervetest inimestest kuni hüpertüreoidismi ja hüpotüreoidismiga patsientideni, vältides suure kontsentratsiooniga proovides konksude mõjudest põhjustatud valehäireid.

Kasvajamarkerite kliinilisel tuvastamisel saab TMB-l põhineva ELISA komplektiga täpselt tuvastada kasvajamarkereid, nagu CEA ja AFP, mille kontsentratsioon seerumis on vaid mõni ng/ml, pakkudes usaldusväärseid kvantitatiivseid tulemusi vähi varajaseks sõeluuringuks ja operatsioonijärgseks retsidiivide jälgimiseks.

Hiina kolmanda taseme haigla patoloogiaosakonna statistilised andmed näitavad, et TMB kolorimeetrilise kasvajamarkerite kombinatsiooni tuvastamise skeemi abil on varase seedetrakti kasvajate tuvastamise määr 25% kõrgem kui traditsiooniliste meetoditega. Abidiagnostika stsenaariumis, mille eesmärk on COVID-19 antigeeni kiire tuvastamine, TMB kui ensümaatilise värvuse kujunemise põhikomponent, välja arvatud kolloidkulla meetod.

Seda kasutatakse suure{0}}läbilaskevõimega ELISA tuvastamissüsteemis COVID-19 antigeeni jaoks. Avastamise tundlikkus on ühe suurusjärgu võrra kõrgem kui traditsioonilisel kolloidkulla meetodil, mis võib saavutada positiivse avastamise madala viiruskoormuse staadiumis, vähendades oluliselt varakult nakatunud inimeste diagnoosimata jätmise määra. Täisautomaatse kemoluminestsents-immunoanalüüsi tugisüsteemis võib TMB kui mädarõika peroksidaasi (HRP) otsese kemoluminestsentsi täiustatud substraat oluliselt parandada luminestsentssignaali intensiivsust ja stabiilsust, suurendada kemoluminestsentsi signaali -/-müra suhet, tuvastada täielikult 3% CV korda. Kõrgetasemeliste täisautomaatsete immuunanalüüsi seadmete-täpse tuvastamise nõuded.

Bioloogiliste uuringute valdkonnastetrametüülbensidiinon eelistatud kromogeenne substraat HRP-ga märgistatud sekundaarsete antikehade jaoks Western blot katsetes ja on üks kõige sagedamini kasutatavaid kromogeenseid reagente molekulaarbioloogia laborites. Traditsioonilistes Western Blot katsetes võib TMB kemoluminestsentsiga täiustatud kolorimeetrilise süsteemi kasutamine tuvastada sihtvalke nii madalal kui pg tasemel.

Võrreldes traditsioonilise DAB kolorimeetrilise meetodiga suureneb tuvastamise tundlikkus kahe suurusjärgu võrra ja see võimaldab hõlpsalt tuvastada madala arvukusega signaaliraja valkude ja transkriptsioonifaktorite ekspressioonimuutusi rakkudes. Kodumaise ülikooli bioloogialabori võrdlusandmed näitavad, et optimeeritud TMB kõrge{{1}tundlikkusega luminestsentslahendust kasutades on Western Blot'i arendusaeg lühenenud traditsiooniliselt 30 minutilt vähem kui 10 sekundini, puhtad taustaribad ja ilma lisanditeta. Selgelt saab eristada kahte sarnast valguriba, mille molekulmassi erinevus on ainult 1 kDa, mis parandab oluliselt valgu immunoblotanalüüsi katsete usaldusväärsust.

Immunohistokeemia ja immunohistokeemia eksperimentaalsetes stsenaariumides võib täiustatud TMB värvimissüsteem genereerida stabiilseid siniseid lahustumatuid tooteid, määrata täpselt kindlaks sihtvalkude ekspressioonipositsioonid koelõikudes ja raku slaididel. Võrreldes traditsioonilise DAB pruunikaskollase värvimisega, eristavad sinised TMB värvimistooted hematoksüliiniga värvitud sinililla tuumadega pehmet värvi, ilma DAB-värvimise tavaliste servade difusiooni ja tausta mittespetsiifiliste värvimisprobleemideta. Neurotransmitteri valgu lokaliseerimise katsetes närvikoes ja PD-L1 valgu ekspressiooni tõlgendamise katsetes kasvajakoes.

TMB värvimistulemuste äratundmine on oluliselt parem kui traditsioonilised värvimismeetodid, aidates teadlastel täpsemalt jälgida valgu subtsellulaarse lokaliseerimise morfoloogiat.

Ensüümide aktiivsuse analüüsi alusuuringute stsenaariumis on TMB spetsiifiline substraat jälgede peroksidaasi aktiivsuse määramiseks. TMB oksüdatsioonikolorimeetrilise spektrofotomeetria põhjal saab täpselt tuvastada HRP ensüümi aktiivsust proovis nii madala kontsentratsiooniga kui 1 ng/ml. See on klassikaline eksperimentaalne meetod taimede peroksüdaasi ja mikroobsete antioksüdantsete ensüümide aktiivsuse uurimiseks. Ühe-molekuli ensümoloogia esirinnas võivad immobiliseeritud TMB-molekulid tekitada ühe HRP ensüümmolekuli katalüüsil lokaalseid värvisademeid.

Üksiku ensüümmolekuli ruumilist jaotust ja katalüütilist kineetikat saab otse jälgida optilise mikroskoobi kaudu, pakkudes intuitiivset vaatlusmeetodit üksiku-molekuli ensümoloogia alusuuringuteks. Nukleiinhapete hübridisatsiooni tuvastamise stsenaariumi korral märgistatakse HRP nukleiinhappesondil ja proovi sihtmärk-nukleiinhappejärjestus tuvastatakse kvantitatiivselt TMB värvi intensiivsusega. Ilma keerukate fluorestsentsi tuvastamise seadmeteta on võimalik teostada odava-nukleiinhapete kvalitatiivset ja kvantitatiivset tuvastamist. Seda on laialdaselt kasutatud geenitüpiseerimisel ja geneetiliselt muundatud komponentide skriinimise katsetes rohujuure tasandi teaduslikes uurimislaborites.

Keskkonnaseire valdkonnastetrametüülbensidiinkasutatakse laialdaselt ülitundliku oksüdatsioonikolorimeetrilise reagendina vesinikperoksiidi ja raskmetalliioonide jälgede kiireks tuvastamiseks vees. Joogivee ohutuse testimise stsenaariumi korral suudab TMB-põhine peroksidaasi simulatsiooni kolorimeetriline tuvastussüsteem kiiresti tuvastada joogivees vesinikperoksiidi desinfitseerimisvahendi jääke kuni 0,01 mg/l, mis on palju alla riiklike joogiveehügieenistandardite piirnõuded.

Avastamisprotsess ei nõua suuri instrumente ning poolkvantitatiivse hinnangu saab lõpetada palja silmaga lahuse sinise sügavuse jälgimisega, mis sobib väga hästi välitingimustes veekvaliteedi erakorraliseks seireks. Raskmetallide ioonide, nagu plii ja elavhõbe, tuvastamise stsenaariumis veekogudes võib funktsionaliseeritud nanokulla simuleeritud peroksidaas spetsiifiliselt reageerida raskmetalliioonidele. TMB värvi intensiivsuse muutmise kaudu on võimalik saavutada raskmetalliioonide kõrge selektiivse visualiseerimise tuvastamine, mille avastamispiir on kuni 1 nM ja tuvastamise maksumus on vaid üks protsent traditsioonilisest aatomabsorptsioonspektroskoopiast.

See on näidanud äärmiselt kõrget kasutusväärtust maapiirkondade joogivee ohutuse kontrollimisel ja tööstusliku reovee väljalaskekohtade kiirel seirel.

Toiduohutuse testimise valdkonnas on TMB mitmesuguste kiirtuvastusega testribade põhiline värviarenduskomponent. Ensüümide inhibeerimise stsenaariumi korral inhibeerivad pestitsiidide jääkide tuvastamine toidus atsetüülkoliinesteraasi aktiivsust fosfororgaanilised ja karbamaatsed pestitsiidid. Peroksidaasi poolt katalüüsitud TMB värvimuutuse ühendamise kaudu saab köögiviljades leiduvate pestitsiidijääkide kohapealse-sõeluuringu kiiresti lõpule viia 10 minutiga.

Avastamistundlikkus vastab riiklike toiduohutusstandardite piirnõuetele ja on kodumaistel põllumajandusturgudel ja rohujuuretasandi reguleerivates osakondades kõige sagedamini kasutatav pestitsiidijääkide kiirtuvastusmeetod. Väikeste molekulidega saasteainete, nagu klenbuterool ja melamiin, ebaseaduslikult toidule lisatud kolloidkulla immunokromatograafilisel tuvastamisel võib TMB-l põhinev ensüümi katalüüsitud täiustatud kolorimeetriline tehnoloogia suurendada traditsiooniliste kolloidkulla testribade tuvastamise tundlikkust enam kui 10 korda, saavutades madala kontsentratsiooni täpse tuvastamise, vähendades illegaalsete lisandite ja valede lisandite suure tõenäosust.

Toidu mikroobse saastumise kiire tuvastamise stsenaariumi korral võib mikroobse metabolismi käigus tekkiva vesinikperoksiidi kasutamine koos TMB värvusreaktsiooniga kiiresti lõpetada toidus leiduvate bakterite koguarvu poolkvantitatiivse sõeluuringu 2 tunni jooksul. Võrreldes traditsioonilise 48-tunnise taldrikukultuuri meetodiga on tuvastamisaeg oluliselt lühem, mis sobib väga hästi toiduainete tootmisliinide kiireks kvaliteedikontrolliks toiduainete tootmisettevõtetes. Aflatoksiin B1 kiirel tuvastamisel teravilja- ja õlitoitudes on TMB-l põhineva ELISA tuvastamissüsteemi minimaalne avastamispiir 0,1 μg/kg, mis vastab täielikult aflatoksiini rangetele piirnormidele rahvustoidus. Tuvastamiskulud on palju madalamad kui suurte instrumentidega massispektromeetriliste tuvastusmeetodite omad, mistõttu sobib see suuremahuliste teravilja ja õliga seotud toiduohutuse uuringute jaoks.