Epitalon(link: https://www.bloomtechz.com/sünteetiline-keemiline/peptiid/epitalon-pulber-cas-307297-39-8.html) on peptiidimolekul, millel on hea bioloogiline aktiivsus ja potentsiaalne raviväärtus. Praegu keskenduvad epitalonpeptiidide uuringud peamiselt selle kasutamisele vananemisvastase ainena.
Epitalon võib pikendada telomeeride pikkust kromosoomide otstes, aktiveerides telomeraasi, mõjutades seeläbi positiivselt tüvirakkude proliferatsiooni ja regeneratsiooni. Uuringud on näidanud, et Epitalon võib märkimisväärselt pärssida kahjulikku oksüdatiivset stressi, vähendada DNA kahjustusi ja reguleerida insuliinitaolise kasvufaktori -1 (IGF-1) ekspressiooni ning lõpuks saavutada rakkude kasvu kiirust vähendava efekti. vananemine ja eluea pikenemine.
Lisaks on Epitalonil ka immunomoduleeriv ja neuroprotektiivne toime. Epitalon võib tugevdada inimese immuunsust ja soodustada heterogeensete ja omaantigeenide äratundmist ja eemaldamist organismist. Lisaks võib Epitalon vähendada ka neuronaalsete rakkude surma ja neurodegeneratsiooni, saavutades seeläbi neuroprotektiivse toime. Epitalonil on ka vähivastane toime ja see avaldab oma mõju rakutsükli reguleerimise, raku apoptoosi soodustamise ja kasvajarakkude proliferatsiooni pärssimise kaudu.
|
|
|
Epitalon on keha tugevdaja, polüpeptiidühend, mis koosneb neljast aminohappest alaniinist (Ala), glutamiinhappest (Glu), asparagiinist (Asp) ja lüsiinist (Lys). Epitaloni sünteesimeetodid jagunevad peamiselt keemiliseks sünteesiks ja biosünteesiks.
Keemilise sünteesi meetod:
Epitalon on peptiid, mis koosneb neljast aminohappest molekulaarse valemiga C14H22N4O9. Epitalon võib soodustada inimese kasvuhormooni vabanemist, aidates seeläbi edasi lükata vananemist, parandada und ja tugevdada immuunsust.
1. Reagendi ettevalmistamine:
Epitaloni sünteesi reagendid hõlmavad nelja aminohapet, alaniini (Ala), glutamiinhapet (Glu), asparagiini (Asp) ja lüsiini (Lys), samuti atsüülivaid reaktiive, nagu Boc-Lys-OtBu ja Asp (OtBu) 2 ja nii edasi. Nende aminohapete ja reaktiivide puhtus peab olema kõrgem kui 99 protsenti, vastasel juhul kahjustatakse toote kvaliteeti.
2. Keemilise sünteesi etapid
2.1 Alaniin-4-hüdroksüvõihappe anhüdriidi (Ala-Hyp) süntees:
First, mix alanine (Ala) and 4-hydroxybutyric anhydride (Hyp-OtBu), and carry out acylation reaction with an activator such as DCC, EDC, etc. under anhydrous environment to generate alanine-4-hydroxybutyric anhydride (Ala-Hyp). The final product was white crystals with >95-protsendiline puhtus.
2.2 Ala-Hyp-Glu-OtBu süntees:
The synthesized alanine-4-hydroxybutyric anhydride and glutamic acid-butyrate (Glu-OtBu) were mixed in proportion, and then underwent multiple condensation reactions in anhydrous environment to obtain Ala-Hyp-Glu-OtBu. The final product is a white powder with a purity >95 protsenti
2.3 Epitaloni süntees:
Lisage Asp(OtBu)2 ja Boc-Lys-OtBu kondensatsioonireaktsioonisüsteemi eelnevalt kavandatud järjekorras ja läbige mitu kondensatsioonireaktsiooni, et saada Epitalon. Protsess on järgmine:
a. Kaitserühma eemaldamise reaktsioon:
Esiteks eemaldati Asp (OtBu) 2 kaitse ja Asp (OtBu) 2 kaitserühm eemaldati naatriumhüdroksiidi (NaOH) ja trikloroäädikhappe (TCA) abil, et genereerida Asp struktuuriüksused ja vabastada samal ajal BuOt. Reaktsiooniaeg oli 1 tund ja temperatuur oli toatemperatuur. Pärast reaktsiooni viige läbi happe-aluse neutraliseerimine, lisage suur kogus küllastunud naatriumkloriidi lahust, seejärel sadestage etanooliga ja kuivatage vaakumis, et saada Asp valge tahke ainena.
b. Kondensatsiooni reaktsioon:
Lisage kondensatsioonireaktsioonisüsteemi Asp ja Ala-Hyp-Glu-OtBu ning seejärel viige Epitaloni saamiseks läbi mitu kondensatsioonireaktsiooni. Seda protsessi tuleb läbi viia erinevate ravimeetodite kaudu.
Esimene samm: eemaldage Ala-Hyp kaitserühm:
Esiteks lahustati Ala-Hyp-Glu-OtBu metanoolis, lisati trikloroäädikhape (TCA) ja vesi, et eemaldada Hyp-OtBu kaitserühm, mida kasutati aminorühma kaitsmiseks, et tekitada Ala-Hyp-Glu-OH. Reaktsioon tuleb läbi viia toatemperatuuril ja reaktsioonisegu töödeldakse pärast reaktsiooni NaOH-ga happesuse neutraliseerimiseks.
Teine samm: eemaldage Glu-OtBu kaitserühm:
Seejärel segati Ala-Hyp-Glu-OH pärast põhjalikku kuivatamist Boc-Lys-OtBu-ga, lisati uuesti trikloroäädikhape ja vesi ning reaktsioon viidi läbi toatemperatuuril. See reaktsioon eemaldab Glu-OtBu kaitserühma, et tekitada Ala-Hyp-Glu-Lys(Boc)-OtBu.
Kolmas samm: eemaldage Lys-i kaitserühm:
Lõpuks eemaldab trikloroäädikhappe, vee ja metanooli lisamine Boc-Lys-OtBu kaitserühma, et tekitada Epitalon. Reaktsioon tuleb läbi viia toatemperatuuril ja reaktsioonisegu töödeldakse pärast reaktsiooni NaOH-ga happesuse neutraliseerimiseks.
3. Tulemuste analüüs:
Lõpuks saadakse Epitaloni produkt, mida saab iseloomustada ja puhastada erinevate analüütiliste meetoditega. Näiteks saab selliseid parameetreid nagu puhtus, lisandid ja kaal määrata puhastusmeetoditega, nagu Euroopa farmakopöa (EP) või Ameerika Ühendriikide farmakopöa (USP).
4. Kokkuvõte:
Epitalon on keha tugevdaja, mis koosneb neljast aminohappest alaniinist, glutamiinhappest, asparagiinist ja lüsiinist. Epitaloni keemilise sünteesi meetod hõlmab peamiselt tahke faasi sünteesi meetodit ja vedelfaasi sünteesi meetodit, mis peavad mitmeetapiliste reaktsioonide kaudu siduma erinevaid aminohappeid. See protsess nõuab reaktsioonitingimuste ja puhastusmeetodite hoolikat kontrollimist, et tagada kõrge puhtusastmega tooted.
Biosünteesi meetod:
Biosünteesi meetod on mikroorganismide või sünteetiliste ensüümide biokatalüüsi kasutamine Epitaloni valmistamiseks, sealhulgas fermentatsioon ja ensüümkatalüüs.
1. Kääritamismeetod: kääritamismeetod on biosünteesimeetod, milles kasutatakse Epitaloni ekspresseerimiseks transgeenset mikroorganismi Escherichia coli. Esmalt pange Epitaloni geenijärjestus Escherichia colisse ja kultiveerige seda ekspressiooniks massiliselt. Seejärel kasutatakse puhaste toodete lõpuks erinevaid puhastusmeetodeid, nagu ioonvahetuskromatograafia ja geelkromatograafia. Konkreetsed sammud on järgmised.
1.1 Valige sobivad peremeesbakterid:
Epitaloni sünteesimiseks on vaja ekspressiooniks valida sobiv peremeestüvi. Tavaliselt kasutatavate peremeesbakterite hulka kuuluvad Escherichia coli (Escherichia coli), pärm (Saccharomyces cerevisiae) ja seened (Aspergillus oryzae). Peremeesbakterite valimisel tuleb arvestada, kas peremeesbakteritel on võime valke tõhusalt sünteesida, kas nad suudavad valke õigesti voltida ja modifitseerida ning kas nad suudavad toota kõrge saagisega sihtprodukte.
1.2 Kujundage geenijärjestus ja kloon:
Pärast peremeesbakterite valimist tuleb DNA rekombinatsioonitehnoloogia abil peremeesbakteritesse sisestada Epitaloni geenijärjestus (sealhulgas alaniini, glutamiinhappe, asparagiini ja lüsiini alusjärjestused). Tavaliselt kloonitakse geenijärjestus ekspressioonivektorisse, mis sisaldab selliseid elemente nagu promootor- ja terminaatorjärjestused ning selekteeritav antibiootikumimarker.
1.3 Ekspresseerimine ja puhastamine:
Pärast kloonimise lõpetamist transformeeritakse ekspressioonivektor peremeesbakteriteks ja seejärel kultiveeritakse. Kultiveerimisprotsessi käigus sünteesivad peremeesbakterid Epitaloni vastavalt ekspressioonivektoris olevale geenijärjestusele. Kui toodet on toodetud piisavas koguses, saab selle erinevate puhastusmeetoditega rakkudest eraldada ja saada kõrge puhtusastmega Epitalon.
2. Ensüümkatalüüsitud meetod: Ensüümkatalüüsitud meetod on Epitaloni sünteesimine, sidudes erinevad aminohapped erinevate ensüümidega. Näiteks L-glutamaadi-5-aminaasi kasutatakse glutamaadi ja butüraadi reaktsiooni katalüüsimiseks Glu-OtBu sünteesimiseks. Seejärel kasutage Epitaloni saamiseks asparagiini ja Ala-Hyp-Glu-OtBu kondensatsioonireaktsiooni katalüüsimiseks L-asparaginaasi.
Epitaloni sünteesimeetodid jagunevad peamiselt keemiliseks sünteesiks ja biosünteesiks. Keemiline süntees on praegu kõige sagedamini kasutatav Epitaloni sünteesimeetod. Biosünteesi käigus valmistatakse Epitalon läbi mikroorganismide või sünteetiliste ensüümide biokatalüüsi, sealhulgas fermentatsiooni ja ensüümkatalüüsi. Kuigi biosünteesimeetoditel on suur potentsiaal, on siiski vaja täiendavaid uuringuid ja optimeerimist. Epitalon on laialdaste kasutusvõimalustega potentsiaalne ravim, mida saab kasutada vananemisvastases, immuunsüsteemi regulatsioonis, neuroprotektsioonis ja vähiravis. Samal ajal saab Epitaloni kasutada ka tervisliku toidu ja tervishoiutootena, et aidata tarbijatel vananemisele vastu seista, tugevdada immuunsust ja vähendada haigestumisriski. Kuigi Epitaloni uurimine on alles lapsekingades, arvatakse, et selle mehhanismi ja funktsiooni põhjaliku uurimisega saab Epitalonist oluline ravim ja tervishoiutoode.