GLP-1(link:https://www.bloomtechz.com/synthetic-chemical/peptide/glp-1-peptid-cas-87805-34-3.html) koosneb kahest omavahel seotud polüpeptiidahelast: peptiidahelast, mille N-otsas on 21 aminohappejääki (GLP-1[7-27]), ja peptiidahelast, mille C-otsas on 30 aminohappejääki. otsas (GLP-1 [28-58]), on ahelate vahel kondensatsioonisild. GLP-1 keemiline valem on C165H264N50O55S2, on molaarmass umbes 3,8 kDa ja CAS 87805-34-3. GLP-1 laetuse olek muutub koos pH-ga. Kui pH on madalam kui GLP-1 isoelektriline punkt, on GLP-1 positiivselt laetud; kui pH on isoelektrilisest punktist suurem, on GLP-1 negatiivselt laetud. Füsioloogilistes tingimustes on GLP-1 tavaliselt negatiivselt laetud. Sellel on tugev redoks- ja proteaasitundlikkus. Füsioloogilistes tingimustes hüdrolüüsitakse GLP{8}} sageli kiiresti proteaaside, nagu trüpsiin, toimel, kaotades seeläbi oma bioloogilise aktiivsuse. Lisaks mõjutavad GLP stabiilsust ka soojusenergia, pH, metalliioonid ja muud tegurid-1. GLP stabiilsuse parandamiseks{10}} kasutavad teadlased selle parandamiseks tavaliselt erinevaid meetodeid, näiteks keemilist muutmist ja molekulaarstruktuuri kohandamist.
Isoelektriline punkt:
GLP-1 on polüpeptiidhormoon, mille isoelektriline punkt (pI) on ligikaudu 5,1. Isoelektriline punkt on pH väärtus, mille juures on konkreetses lahuses võrdne arv positiivselt ja negatiivselt laetud ioone. Kui aine on oma isoelektrilises punktis, ei ole sellel netolaengut, seega ei avaldata sellele elektriväljas elektroforeetilisi jõude ja seetõttu ei liigu see kummalegi poolusele.
Kuna GLP-1 isoelektriline punkt on madalam kui füsioloogilise keskkonna pH väärtus, on see in vivo positiivselt laetud. Sellised omadused võimaldavad GLP-1-l kiiresti läbida rakumembraani läbi mõnede molekulaarsete transporterite, näiteks GLP-1 retseptori (GLP-1R) ja seonduda GLP-1R-ga. rakus, täites seeläbi oma erinevaid füsioloogilisi funktsioone. GLP-1 isoelektriline punkt on umbes 5,9, st kui see on pH-l =5,9, on netolaenguga GLP-1 peptiidimolekuli laengu number null. See tähendab, et erinevate pH-tingimuste korral muutub ka GLP{11}} laengu olek, mõjutades seeläbi selle bioloogilist aktiivsust organismis.
Lisaks isoelektrilisele punktile on GLP{0}}-l ka muid füüsikalisi ja keemilisi omadusi ning struktuurseid omadusi, nagu molekulmass, aminohappejärjestus, ruumiline konfiguratsioon, hüdrofiilsus, lahustuvus jne. Need füüsikalised ja keemilised omadused ning struktuuriomadused on GLP-1 toimimise ja funktsioonide jaoks in vivo väga olulised ning on ka GLP-1 uurimise ja rakendamise võtmeaspektid.
tasu:
GLP-1 on polüpeptiidhormoon. Selle molekulaarstruktuur sisaldab kahte looduslikku aminohappejääki, tsüsteiini ja leutsiini. Need jäägid võivad teatud tingimustes läbida oksüdatsioonireaktsioonid, moodustades disulfiidsidemeid (SS-sidemeid). Seega mõjutab see GLP-1 laenguomadusi.
Füsioloogilises keskkonnas on GLP{0}} tavaliselt positiivse laenguga omadus. Selle põhjuseks on asjaolu, et selle isoelektriline punkt on umbes 5,1, mis on madalam kui füsioloogiline keskkond, mille pH väärtus on 7,4, mistõttu on N-otsa aminorühm osaliselt protoneeritud. muuta kogu molekul positiivselt laetuks. Sel juhul saab GLP-1 kiiresti siseneda ja kombineerida lahtris GLP-1R-ga mõne transporteri, näiteks GLP-1 retseptori (GLP-1R) kaudu ja mängida erinevaid füsioloogilisi funktsioone. GLP{10}} laetuse olek muutub koos pH-ga. Kui pH on madalam kui GLP-1 isoelektriline punkt, on GLP-1 positiivselt laetud; kui pH on isoelektrilisest punktist suurem, on GLP{13}} negatiivselt laetud. Füsioloogilistes tingimustes on GLP{14}} tavaliselt negatiivselt laetud.
Teatud asjaoludel võib aga GLP-1 SS-sidet vähendada, mille tulemusel see kaotab oma positiivse laengu ja omandab neto laetud oleku või negatiivselt laetud omadused. Laboris saab seda redutseerimisreaktsiooni soodustada redutseerija nagu DTT (ditiotreoonhape), muutes seeläbi GLP-1 laengu olekut.
Kokkuvõttes mõjutavad GLP{0}} laengu olekut paljud tegurid, sealhulgas selle isoelektriline punkt, molekuli keemilised funktsionaalrühmad ja välised keskkonnatingimused. Need omadused ja omadused on GLP-1 funktsiooni ja rolli jaoks in vivo väga olulised ning on GLP-1 uurimise ja rakendamise võtmeaspektid.
stabiilsus:
GLP{0}}-l on tugev redoks- ja proteaasitundlikkus. Füsioloogilistes tingimustes hüdrolüüsitakse GLP-1 sageli kiiresti proteaaside, nagu trüpsiin, toimel, kaotades seeläbi oma bioloogilise aktiivsuse. Lisaks mõjutavad GLP stabiilsust ka soojusenergia, pH, metalliioonid ja muud tegurid-1. GLP{3}} stabiilsuse parandamiseks kasutavad teadlased selle parandamiseks tavaliselt erinevaid meetodeid, nagu keemiline modifitseerimine ja molekulaarstruktuuri kohandamine.
Triivimise aeg:
GLP-1 (glükagoonilaadne peptiid-1) on polüpeptiidhormoon, mida saab massispektromeetria abil tuvastada ja kvantifitseerida. Vedelikkromatograafia-massispektromeetria (LC-MS) tehnoloogias viitab GLP-1 triiviaeg ajale, mis kulub ioonide triivimiseks elektrivälja kokkupõrke tõttu ja lõpuks detektorini jõudmiseks. Triivimisaeg viitab ajale, mille jooksul lahuses olevad molekulid läbivad kromatograafilist kolonni, mis võib kajastada molekulide suurust, kuju ja laengu olekut. Peptiidimolekulide, nagu GLP-1 puhul on triivimisaeg tavaliselt lühike ja seda saab läbida mõne minutiga.
Triiviaeg on massispektromeetria tehnoloogia üks olulisi analüüsiparameetreid, mida saab kasutada erinevate ühendite erinevuste tuvastamiseks ja isomeeride eristamiseks jne. GLP{0}} puhul saab triiviaega kasutada erinevuste tuvastamiseks see ja muud peptiidid või lisandid ning neid kasutatakse edaspidi kvantitatiivseks analüüsiks.
Üldiselt mõjutavad LC-MS massispektromeetria triiviaega paljud tegurid, nagu massispektromeetri tüüp, ionisatsioonirežiim, kokkupõrkegaasi tüüp, pinge, temperatuur jne. Seega, kui triiviaega kasutatakse identifitseerimise ja kvantifitseerimise alusena tuleb katsetingimusi optimeerida ja standardida, et saada reprodutseeritavaid tulemusi.
GLP{0}} triiviaeg viitab ajale, mis kulub selle ioonide jõudmiseks detektorini elektrivälja triivi tõttu, mida saab kasutada LC-MS-tehnoloogias analüütilise parameetrina peptiidide ja peptiidide tuvastamiseks ja kvantifitseerimiseks. nende isomeeride keha jne.
Kokkuvõttes on GLP{0}} väike peptiidimolekul, mis on väga hüdrofiilne ja füsioloogilises keskkonnas stabiilne, kuid on vastuvõtlik ka redoks- ja proteaasitundlikkusele. GLP-1 füüsikaliste omaduste mõistmine on uute GLP-1 ravimite väljatöötamisel ja nende bioloogilise aktiivsuse uurimisel väga oluline.