Gonadoreliin atsetaatpeptiid

Vedelafaasi süntees ühendab järk -järgult aminohapped kaitserühma strateegia kaudu lahuses, mis sobib lühikeste polüpeptiidide ahelate sünteesimiseks, mis sisaldavad spetsiaalseid struktuure, näiteks disulfiidsidemeid. Tuum seisneb kaitserühmade valimisel ja eemaldamise järjestuses, et vältida külgreaktsioone.

Deprotection ja puhastamine:
Kasutades TFA -d BOC rühmade ja püridiini eemaldamiseks FMOC rühmade eemaldamiseks, saadi lineaarne peptiid PyrhistrpSertyrglyleuargproglynh2.
Puhastamine HPLC poolt ja külmutage - kuivatamine toornafta saamiseks.

Eelised: reaktsioonitingimuste täpne kontroll, mis sobib peptiidi ahela keeruka sünteesi jaoks; Pole vaja kindlaid faasikandjaid, vähendades kulusid.
Piirangud: sammud on tülikad ja vajavad mitut puhastamist; Reaktsiooni vaheühendusi tuleb tootmistsükli pikendamiseks puhastada.

Teatud uuringus kasutati vedelat - faasi sünteesi meetodit lõikamisreaktiivi valemi optimeerimiseks (88% TFA +5% aniise sulfide +5% vesi +2% etaaneditoolil), mis suurendas toornafta saaki 91,8% -ni ja toote punni kuni 99% -ni üle 99%.

Gonareliintsetaadi molekulaarne valem on C ₅₇ h ₇₉ n ₁₇ o ₁₅, molekulmassiga 1242,36 da. Selle põhistruktuur on dekapeptiidi ahel, mis koosneb järgmistest aminohapete järjestustest:

5 - oksopropüül -} l - histoyl - l - tryptophan - l- trüptophan {8 {8} {1} {9} {9} 0}} l {- türosüül - glycyl - l {- leucyl - l - arginiil- l {{18} prolüül.
Selles struktuuris moodustab esimene 5 - oksoproliin (püroglutamiinhape) tsüklilise struktuuri, suurendades molekulaarset stabiilsust; Glütsiin (gly) positsioonis 6 ja glütsinamiid (gly - nh ₂) positsioonis 10 on paindlikud segmendid, mis annavad molekuli konformatsioonilise painduvusega; Kolmas trüptofaan (TRP) ja viies türosiin (Tyr) sisaldavad aromaatseid rõngaid ja võivad osaleda molekulidevahelistes interaktsioonides π - π virnastamise kaudu.
Atsetaatvormi (CH3 COO ⁻) kasutuselevõtt ei suurenda mitte ainult ravimi lahustuvust (vees lahustuvusega kuni 25 mg/ml), vaid seostub ka ahela amino- või karboksüülrühmadega ioonsidemete kaudu, moodustades stabiilse soola struktuuri ja vähendades peptiidi ahela lagunemise riski ladustamise ajal.

Hüdroksüül-, amino-, karboksüülrühmade võime moodustada vesiniksidemeid veemolekulidega nõuab koputamise või lagunemise vältimiseks kuivas keskkonnas hoidmist.
Lahustuvus:
Selle ühendi lahustuvus vees (25 mg/ml) on metanoolis pisut lahustuv ja seda saab täielikult lahustada 1% äädikhappe lahuses. Selle lahustuvust mõjutab märkimisväärselt pH: happelistes tingimustes (näiteks 1% äädikhape) vähendab karboksüülprotoneerimine molekulidevahelist elektrostaatilist tõrjumist ja soodustab lahustumist; Neutraalses või aluselises keskkonnas võib karboksüülrühmade deprotoneerimine käivitada molekulidevahelise agregatsiooni, põhjustades lahustuvuse vähenemise.

Sulamispunkt ja termiline stabiilsus:
Eksperimentaalsed andmed näitavad, et sulamistemperatuur on kõrgem kui 155 -kraadine C (lagunemine), mis näitab tugevat termilist stabiilsust. Kõrge temperatuur võib siiski põhjustada peptiidisideme hüdrolüüsi või aminohapete külgahela oksüdeerumist, seetõttu tuleb tegelikku ladustamist kontrollida vahemikus -20 kraadi C kuni 8 kraadi C, et laguneda lagunemist.

Spektrilised omadused:
UV -neeldumisspekter näitab maksimaalset neeldumispiigi kiirusel 278 nm, mis vastab trüptofaani ja türosiini aromaatse tsükli konjugeeritud süsteemile. Seda funktsiooni saab kasutada kvantitatiivseks analüüsiks (näiteks spektrofotomeetriline määramine) või puhtuse võrdlemiseks võrdlusstandarditega õhukese kihi kromatograafia (TLC) kaudu.

Hüdrolüütiline stabiilsus
Suhteliselt stabiilne happelistes või neutraalsetes tingimustes, kuid peptiidisideme hüdrolüüsi suhtes aluselises keskkonnas. Näiteks tugevate aluste (näiteks NaOH) toimel võib peptiidiside 6. glütsiini ja 7. leutsiini vahel puruneda, tekitades lühikesi peptiidifragmente. Lisaks on kolmanda trüptofaani indoolitsüklil heledates või oksüdatiivsetes tingimustes avanemiseks kalduvus, mis põhjustab ravimi aktiivsust.

Hapniku või vabade radikaalide juuresolekul võivad need funktsionaalrühmad läbi viia oksüdatsioonireaktsioonid, tekitades peroksiide või hüdroksüülrivaate, mis omakorda käivitab ahela lagunemise. Seetõttu lisatakse stabiilsuse suurendamiseks sageli antioksüdante (näiteks C -vitamiini).

Kerge stabiilsus
Tundlikkus valguse suhtes, eriti ultraviolettvalgus (200–400 nm), võib otseselt häirida trüptofaani konjugeeritud süsteemi või põhjustada kaudselt oksüdatiivset lagunemist vabade radikaalide tekke kaudu. Kliinilised süstid tuleks pakendada pruunidesse klaasist pudelitesse ja hoida valgusest eemal.

Retseptori sidumisaktiivsus
Sidudes kõrge afiinsusega GnRH retseptoriga kümne struktuuri kaudu eesmises eesmises nääres, käivitatakse rakusisene signaalimine (näiteks Camp/PKA rada), mis viib gonadotropiinide vabanemiseni (FSH, LH). Selle seondumisaktiivsus sõltub:
Esimese 5-oksoproliini ja retseptori tasku tsüklilise struktuuri komplementaarsus;
Π - π interaktsioon kolmanda trüptofaani aromaatse tsükli ja retseptori hüdrofoobse piirkonna vahel;
8. arginiini positiivne laeng köidab elektrostaatiliselt retseptori happelist jääki.

Kahefaasiline mehhanism
Lühiajaliselt manustamisel stimuleerib see FSH/LH vabanemist hüpofüüsist ja suurendab suguhormoonide taset; Pikaajaline manustamine viib FSH/LH sekretsiooni pärssimiseni retseptori desensibiliseerimise tõttu, vähendades lõpuks suguhormoonid kastreerimise tasemeni. See omadus teeb selle alternatiiviks kirurgilisele kastreerimisele eesnäärmevähi ravis, vähendades samal ajal kirurgiliste komplikatsioonide riski.

Polümorfsed lagunemissaadused:
Keha metaboolse protsessi käigus võib ensümaatilise hüdrolüüsi (näiteks peptidaasi toime) või mitte -ensümaatilise lagunemise (näiteks oksüdatsiooni) kaudu tekitada erinevaid metaboliite. Näiteks võib 6. glütsiini hüdrolüüdada üheksa peptiidi fragmenti; Trüptofaani oksüdeerimine kolmandas positsioonis tekitab hüdroksüülrivaate. Nende metaboliitide aktiivsus tuleb tuvastada massispektromeetria (LC- ms) või tuuma magnetresonantsi (NMR) abil nende ohutuse hindamiseks.
Narkootikumide koostoimed:
Kui seda kasutatakse koos ravimitega, mis sisaldavad metalliioone (näiteks teatud antibiootikume), siis lahustuvus või aktiivsusgonadoreliin atsetaatpeptiidvõib kelaatimise tõttu vähendada. Lisaks võib selle happeline soolavorm läbi viia aluseliste ravimitega (näiteks antihistamiinid) neutraliseerimisreaktsioone, ja tuleks vältida segasüste.