IPTG reaktiiv CAS 367-93-1

IPTG reaktiivkeskendume orgaanilise sünteesi tehnoloogiale alates 2008. aastast. Saame välja töötada kvaliteetseid-tooteid, sõltudes täielikult meie suurepärasest uurimis- ja arendusmeeskonnast. IPTG, CAS 367-93-1, keemiline struktuur koosneb isopropüül--st, koosneb D-tiogalaktosiidi- ja fosfaatrühmadest. Nende hulgas - D-tiogalaktosiid on galaktoosi analoog, milles hapnikuaatomit asendab väävliaatom. See spetsiaalne glükosiidstruktuur võimaldab IPTG-l seonduda DNA-ga ja indutseerida geeniekspressiooni. IPTG lahustuvus vees on madal, kuid see võib hästi lahustuda füsioloogilises soolalahuses ja fosfaatpuhvris. See on happeline pKa väärtusega 4,5, mis on oma molekulaarstruktuuris seotud fosfaatrühmaga. Seda ei ole lihtne puhtas vees kristalliseeruda, kuid see võib moodustada kristalle kõrge kontsentratsiooniga lahustes või muude ühendite lisamisel. Tänu oma võimele indutseerida bakteriaalset valgu ekspressiooni, on IPTG tundlik teatud mikroorganismide suhtes.

Me ei tee suurele keemiale midagi häbi! Ärge usaldage ebamõistlikku hinda, palun võrrelge hinda sama kvaliteediga.

Biosünteesi meetodIPTG reaktiivkasutab tavaliselt mikroorganismide või ensüümide katalüütilist toimet galaktoosi muundamiseks isopropüülrühma - - D- tiogalaktosiidiks.

Toorainena galaktoos

Esiteks on vaja toorainena kasutada galaktoosi. Galaktoos on viie süsinikuga suhkur, mida leidub looduses laialdaselt ja mida võib saada siirupi või kristallidena. Biosünteesi käigus muudetakse galaktoos isopropüüliks rea ensümaatiliste reaktsioonide kaudu - - D- tiogalaktosiidiks.

Mikroobikultuur ja galaktoosi metabolism

Järgmiseks on vaja valida katalüsaatoriteks sobivad mikroorganismid, mille hulka kuuluvad tavaliselt bakterid, pärm ja hallitusseened. Kultiveerige neid mikroorganisme söötmes, et võimaldada neil sobivates tingimustes kasvada ja paljuneda. Samal ajal tarbivad mikroorganismid galaktoosi kui toitainet ja metaboliseeritakse soovitud vaheühendiks mitmete ensümaatiliste reaktsioonide kaudu. Spetsiifiline reaktsioonimehhanism ja keemiline võrrand selles etapis varieeruvad sõltuvalt mikroorganismide tüübist ja kultiveerimistingimustest.

Isomerisatsioonireaktsioon tekitab isopropüülrühma - - D-tiogalaktosiid-5'-fosfaatester

Mikroorganismide poolt toodetud ensüümide toimel läbivad vaheproduktid isomeerimisreaktsiooni, mille tulemusena moodustuvad isopropüülrühmad - - D-tiogalaktosiid-5'- fosfaatester. Selle etapi reaktsioonimehhanismiks on galaktoosi hüdroksüülrühma ülekandmine uridiintrifosfaadiks, tekitades isopropüülrühma - - D-tiogalaktosiid-5'-fosfaadi ja uridiindifosfaadi. Spetsiifiline keemiline võrrand on järgmine:

(CH₂oh)₂CHOH-OH + C₃H₇ClN₂O₂S + UDP → (CH₂oh)₂CHOH-O-P(U) + C₁₀H₁₅N₅O₁₀P₂ + C₃H₇N

Kaitse eemaldamise rühm tekitab isopropüülrühma - - D-tiogalaktosiidi

Viimane samm on isopropüülrühmast kaitserühma eemaldamine- - D-tiogalaktosüül-5 '- fosfaatestri muundamine sihttoote isopropüül- - D-tiogalaktosiidiks. See etapp nõuab tavaliselt happe või leelise lahuse kasutamist reaktsiooni soodustamiseks katalüsaatorina. Spetsiifiline keemiline võrrand on järgmine:

(CH₂oh)₂CHOH-O-P(U) + H₂O → (CH₂oh)₂CHOH-OH + P (i)

Eraldamine ja puhastamine

Kasutades eraldamis- ja puhastamismeetodeid, nagu ekstraheerimine, adsorptsioon, kromatograafia jne, puhastati sihtprodukt isopropüül. Reaktsioonisegust ekstraheeriti - - D- tiogalaktosiid. Selle etapi eesmärk on eemaldada lisandid ja parandada toote puhtust, et vastata praktiliste rakenduste vajadustele

IPTG reaktiivIsopropüül- -D-tiogalaktosiid, ingliskeelne nimi IPTG. Platseebo indutseerijana on X-gal kromogeenne substraat, mida mõlemat kasutatakse sini-valge sõeluuringu jaoks. IPTG võib indutseerida Chemicalbooki vektori lac-operoni DNA segmendi sünteesima -galaktosidaasi amino-terminaalset fragmenti, mis võib saavutada intrageense komplementatsiooni (komplementatsiooni) peremeesrakkude poolt kodeeritud defektse -galaktosidaasiga.

1. Biomaterjali ettevalmistamine:

IPTG-d saab kasutada teatud biomaterjalide, näiteks polüsahhariidide, liposoomide jne valmistamiseks. Spetsiifiliste rakumembraanide või valkudega seondudes võib IPTG edendada rakkude või kudede spetsiifilisi füsioloogilisi funktsioone, pakkudes uusi uurimisvahendeid ja ravistrateegiaid biomeditsiinitehnika valdkonnas. Näiteks kasutades IPTG-d indutseerijana, võib see soodustada sihtvalkude ekspressiooni ja sekretsiooni insenerbakterites või pärmirakkudes, mida saab kasutada spetsiifiliste funktsioonidega biomaterjalide tootmiseks.

 

Need biomaterjalid võivad sisaldada polüsahhariide, liposoome, valgukomplekse jne.
Biomaterjalide valmistamise protsessis võib IPTG kasutamine lihtsustada tootmisprotsessi, parandada tootmise efektiivsust ja vähendada tootmiskulusid. Samal ajal saab sihtvalgu ekspressioonitasemete ja biomaterjali omaduste täpset reguleerimist saavutada, kontrollides IPTG lisamise kogust ja kestust.

2. Narkootikumide sõeluuring:

 

IPTG-d kasutatakse peamiselt ravimite skriinimisel sihtgeenide ekspressiooni esilekutsumiseks ja sihtgeenide ekspressiooniproduktide skriinimiseks. Täpsemalt võib IPTG toimida laktoosioperonite indutseerijana, seondudes lac|-ga tooted, mis põhjustavad lac |. konformatsioonilisi muutusi produktid lacO-st eemal, aktiveerides seeläbi transkriptsiooni ja saavutades sihtgeeni kõrge ekspressiooni. Sinivalge sõelumisprotsessi käigus indutseeritakse IPTG-ga ilma rekombinantsete plasmiidideta transformante, moodustades kromogeense substraadi X-gal juuresolekul siniseid kolooniaid.

Võõrfragmentide sisestamisel kaovad saadud peptiidifragmendid. Komplementaarne võime: Rekombinantseid plasmiide ​​sisaldavad transformeeritud rekombinantid võivad moodustada ainult valget Escherichia colit kromogeensel induktsioonisöötmel. See värvimuutustel põhinev ravimite skriinimise meetod mängib olulist rolli spetsiifiliste haigustega seotud valkude uurimisel ja uute ravimite sihtmärkide otsimisel.

3. Geneetilised uuringud:

 

IPTG-d kasutatakse geeniuuringutes sageli molekulaarse tööriistana. Spetsiifilise geenijärjestusega seondudes saab IPTG reguleerida selle geeni ekspressioonitaset, uurides seeläbi selle seost spetsiifiliste fenotüüpide või haigustega.
Geeniuuringutes kasutatakse IPTG-d peamiselt indutseerijana ja see võib simuleerida laktoosi indutseerivat toimet laktaasile. Tavaliselt kasutatakse seda eksogeensete geenide ekspressiooni esilekutsumiseks, eriti molekulaarbioloogias ja geenitehnoloogia uuringutes.
IPTG kasutamisel seostub see sihtgeenidega ekspressiooniperemeestes nagu Escherichia coli. Konstrueerides ekspressioonivektorisse sihtgeeni koos sobivate promootorite ja regulatoorsete elementidega, võib see Escherichia coli rakkudes valke toota. Sellel indutseeritud toimel on suur tähtsus geenifunktsiooni, valkude interaktsioonide uurimisel ning uute ravimite ja biomaterjalide väljatöötamisel.

Lisaks saab IPTG-d kasutada ka indutseerijana valkude kristallisatsioonikatsetes, et soodustada valkude kristalliseerumist. Selle toimemehhanism on muuta valkude konformatsiooni, seondudes valkude hüdrofoobsete piirkondadega, soodustades seeläbi valgumolekulide vahelist agregatsiooni ja kristalliseerumist.

See agregatsiooni- ja kristalliseerumisprotsess on pöörduv, nii et valgu kristalliseerumist saab esile kutsuda IPTG lisamisega või valgu kristalle saab lahustada IPTG eemaldamisega.

4. Põllumajanduslik rakendus:

 

Põllumajandusrakendustes,IPTG reaktiivkui uut tüüpi biopestitsiid, on sellel herbitsiidispetsiifiline toime. See võib häirida galaktoosi normaalset metabolismi taimedes, mõjutades seeläbi nende normaalset kasvu. See interferentsmeetod on mõne umbrohu suhtes tundlikum, nii et IPTG-ga saab tõhusalt eemaldada umbrohu ilma põllukultuure kahjustamata. Kuna IPTG on uut tüüpi biopestitsiid, on sellel võrreldes traditsiooniliste keemiliste pestitsiididega parem keskkonnasõbralikkus ja suurem ohutus inimestele ja loomadele. Seetõttu on IPTG-l laialdased kasutusvõimalused põllumajanduslikes rakendustes.

Võimalik häire geeniekspressiooni regulatsioonis

 

Mittespetsiifiline induktsioon

IPTG-l kui indutseerijal on oma toime teatud spetsiifilisus, kuid mõnel juhul võib esineda mittespetsiifiline induktsioon. IPTG mitte ainult ei indutseeri sihtgeenide ekspressiooni, vaid võib mõjutada ka teiste geenide ekspressiooni rakkudes. See võib olla tingitud asjaolust, et pärast seda, kui IPTG seondub repressorvalguga, muudab see repressorvalgu konformatsiooni ja funktsiooni, põhjustades sellel teatud mõju teistele operonitele, leevendades seeläbi mittesihtgeeni ekspressiooni pärssimist.

Mittespetsiifiline induktsioon võib põhjustada muutusi rakusisese valgu ekspressiooniprofiilides, tekitades ootamatuid valke, mis mitte ainult ei sega katsetulemuste analüüsi ja hindamist, vaid võivad avaldada ka kahjulikku mõju rakkude normaalsetele füsioloogilistele funktsioonidele. Näiteks mõnedes valguekspressioonikatsetes leiti pärast IPTG-ga indutseerimist lisaks sihtvalgu ekspressiooni suurenemise tuvastamisele ka mõnede teiste tundmatute valkude ekspressiooni ülesreguleerimine. Need mittespetsiifilised ekspresseeritud valgud võivad häirida sihtvalgu puhastamist ja funktsionaalseid uuringuid.

Indutseeritud ekspressiooni pöördumatus

Tavaolukorras peaks geeniekspressioon pärast indutseerija eemaldamist taastuma induktsioonieelsele tasemele. Uuringud on aga näidanud, et IPTG indutseeritud geeniekspressioonil võib olla teatav pöördumatus. Kui geeniekspressiooni esilekutsumiseks on kasutatud IPTG-d, võib geeniekspressiooni tase püsida kõrgel tasemel, isegi kui IPTG on eemaldatud, ja seda ei saa enne indutseerimist algtasemele taastada.

Selle pöördumatuse põhjuseks võivad olla IPTG poolt indutseeritud pikaajalised{0}}rakusisesed muutused, nagu muutused kromatiini struktuuris ja transkriptsioonifaktorite modifikatsioonid, mis säilitavad geenide transkriptsiooni aktiivsuse kõrge taseme. Indutseeritud ekspressiooni pöördumatus võib tekitada suuri raskusi katsetes, eriti katsetes, mis nõuavad geeniekspressioonitasemete täpset reguleerimist, mis võib viia ebatäpsete ja mittereprodutseeritavate katsetulemusteni.

Tänu oma stabiilsele molekulaarstruktuurile ja usaldusväärsele indutseerivale aktiivsusele on IPTG muutunud asendamatuks reaktiiviks molekulaarbioloogia laborites kogu maailmas. Seda kasutatakse laialdaselt rekombinantsete valkude ekspressioonis, geenifunktsioonide uuringutes ja mikroobide insenerikatsetes, pakkudes stabiilset induktsiooniefekti teadusuuringuteks ja tööstuslikuks tootmiseks. Meie pikaajaline keskendumine-orgaanilisele sünteesitehnoloogiale ja rangele kvaliteedikontrollile tagab, et meie IPTG-tooted säilitavad kõrge puhtuse, stabiilsuse ja järjepidevuse ning vastavad tõhusalt teaduslike katsete ja tööstuslike rakenduste nõudmistele.

Professionaalse uurimis- ja arendusmeeskonna toel jätkame sünteesiprotsesside optimeerimist ja toote jõudluse parandamist, et teenindada paremini ülemaailmseid teadlasi ja tootjaid. IPTG jääb oma selge toimemehhanismi, stabiilsete omaduste ja laialdase kohaldatavusega bioteaduste uuringute põhireagendiks ning me jätkame kvaliteetsete toodete ja professionaalse tehnilise toe pakkumist biotehnoloogia edendamiseks.

Kuum tags: iptg reagent cas 367-93-1, tarnijad, tootjad, tehas, hulgimüük, ost, hind, hulgi, müük